亞硝酸鹽,廣泛存在于人類環(huán)境中,是自然界中普遍的含氮化合物,人體內(nèi)硝酸鹽在微生物的作用下可還原為亞硝酸鹽,N-亞硝基化合物的前體物質(zhì),2017年10月27日,世界衛(wèi)生組織癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的致癌物清單初步整理參考,在導(dǎo)致內(nèi)源性亞硝化條件下攝入的硝酸鹽或亞硝酸鹽在2A類致癌物清單中。
紫外可見分光光度計(jì)在測(cè)亞硝酸鹽領(lǐng)域中的應(yīng)用:
1、制備樣品溶液:用合適儀器將樣品混合均質(zhì),樣品溫度不能超過25℃。如果使用絞肉機(jī),至少要使樣品從機(jī)器中絞兩遍。稱取10g混合均勻的樣品,移入廣口錐形瓶中,加入50ml水,均質(zhì)30~60s。用50mL熱水清洗均勻漿器的軸,連洗液一并移入錐形瓶中,再加入0.2ml溴百里酚藍(lán)溶液,用氫氧化鈉溶液滴定提取液,直到溶液顏色從黃色變?yōu)闇\綠色/灰綠色,然后在沸水浴中加熱15min。在加熱過程中,反復(fù)震蕩,用勻漿機(jī)將其中的固體顆粒全部溶解。
2、在了解掌握此方法時(shí),為了在調(diào)解PH時(shí)熟悉顏色的變化,可先滴定少量樣品提取液,并使用指示劑,然后測(cè)量其PH。生肉產(chǎn)品的PH不能超過8.5,若超過,其溶液就不能通過滴加卡瑞試劑后過濾來使之純化。如果是熟肉產(chǎn)品,這種危險(xiǎn)則不易發(fā)生,PH可允許達(dá)到9.5.如果使用PH計(jì),則將PH調(diào)到8~8.5。
3、檢測(cè)熟香腸,調(diào)節(jié)PH時(shí),顏色變?yōu)闇\綠色(瞬間)為檢測(cè)終點(diǎn)。另一方面,如果檢測(cè)生香腸提取物,這一顏色變化通常比較緩慢,且顏色變?yōu)榛揖G色。如果檢測(cè)帶血的熟香腸,觀察到的顏色與之相似。即使提取液中含有很多的天然色素,通過幾次練習(xí)這一顏色變化也能被輕易地辨別出來,盡管提取液的顏色會(huì)附加在指示劑的顏色之上,使實(shí)際顏色與理論推測(cè)的經(jīng)常不同。
4、檢測(cè)生香腸的提取液,經(jīng)過一定時(shí)間 后可能觀察到相反的顏色變化。這種情況下,滴加氫氧化鈉來調(diào)節(jié)PH。
5、冷卻至室溫,將錐形瓶中一定量的提取液移入200ml容量瓶中,加入1號(hào)卡瑞溶液各4mL,每次加完后振蕩容量瓶。用水稀釋至刻度,混合均勻,并用濾紙過濾,棄去前20mL濾液。剩余澄清的濾液用于檢測(cè)樣品溶液。
作為實(shí)驗(yàn)室中比較常見的儀器設(shè)備,紫外可見分光光度計(jì)具有以下功能:
1、光度測(cè)量:單點(diǎn)采集也叫單點(diǎn)波長,可直接測(cè)試單點(diǎn)波長的透過率、吸光度、濃度、反射率。
2、定量測(cè)量:測(cè)量模式分三檔,單波長,雙波長,三波長選擇任意項(xiàng)。測(cè)量方法:K系數(shù)法、單點(diǎn)標(biāo)定、多點(diǎn)標(biāo)定。
3、多波長測(cè)量:多波長測(cè)量模式分為透射比和吸光度兩選項(xiàng)。測(cè)量波長數(shù),可設(shè)置1~6個(gè)波長點(diǎn)。
4、數(shù)據(jù)處理:載入曲線、恢復(fù)顯示原始曲線、打印輸出。曲線運(yùn)算、導(dǎo)數(shù)、平滑、多點(diǎn)采集、峰谷。
5、系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)置功能:氘燈鎢燈開關(guān)選項(xiàng)、波長修正、燈源切換波長、樣品參考交換。